Aglutinacija krvi je aglutinacija in sedimentacija rdečih krvnih celic, bakterij in drugih celic, ki nosijo antigene.
Proces poteka pod vplivom aglutininov, ki so specifične snovi. Kot te snovi delujejo lektini ali protitelesa.
Možne vrste aglutinacije pri določanju krvne skupine
Aglutinacija je specifična in nespecifična. V prvem primeru se reakcija pojavi s sodelovanjem treh komponent:
- antigeni;
- protitelesa;
- elektroliti (uporabite izotonično raztopino).
Pri določanju krvne skupine se uporabljajo vse možne vrste aglutinacije, vendar to ni edini primer.
Za kakšen namen se uporablja?
Test aglutinacije krvi se uporablja za identifikacijo povzročitelja nalezljive bolezni. Hkrati se usede in ga je enostavno zaznati v usedlini. Ta postopek se uporablja, kot je navedeno zgoraj, pri določanju krvne skupine. O tem bomo razpravljali v nadaljevanju.
Kakšne so funkcije?
Eritrociti vsebujejo antigene tipa A in B. Tivežejo na protitelesa ά oziroma β. Krvne skupine in reakcije aglutinacije:
- 1, 0 (ά, β) - brez antigenov na površini eritrocitov;
- 2, A (β) – prisotna antigen A in protitelo β;
- 3, B (ά) - vsebuje antigen B in protitelo ά;
- 4, AB (00) – prisotna sta dva antigena, brez protiteles.
Omeniti velja, da so antigeni že opaženi v zarodku. Kar zadeva protitelesa, se pojavijo po rojstvu, v prvem mesecu življenja.
Združljivost ljudi je odvisna od krvne skupine. To je razlog za zavrnitev ploda s strani materinega telesa. Z drugimi besedami, ima protitelesa proti krvnim antigenom nerojenega otroka. V tem primeru pride do nezdružljivosti. Poleg tega je treba pri transfuziji upoštevati krvno skupino.
Priprava
Krvne skupine in reakcije aglutinacije so združljivi pojmi, ki se pogosto uporabljajo v medicini.
Pred testom je pomembno upoštevati določena navodila. Začasno je treba izključiti uporabo nekaterih živil in zdravil. To bo pomagalo, da bodo rezultati natančnejši. Priporočila, ki jih je treba upoštevati, predpiše zdravnik. Dejstvo je, da različni laboratoriji morda nimajo enakih razponov pridobljenih vrednosti, torej so nekoliko različni.
Preizkusni pogoji
Za natančno določitev krvne skupine je pomembno izbrati pravo opremo. Ti vključujejo:
- fiziološka raztopina in pipeta;
- steklene palice;
- standardni izohemaglutinacijski serumi;
- suhe lončene plošče, ki so razdeljene na 4 sektorje.
Obstajajo zahteve za pogoje testa:
- dnevna svetloba;
- sobna temperatura nad +16 ˚С;
- z uporabo volumnov krvi in seruma v razmerju 1:10;
- Zanesljivi rezultati v 5 minutah.
Zgoraj so glavni pogoji in orodja. Aglutinacija krvi se lahko izvaja na več načinov in vsak od njih postavlja posamezne zahteve.
Metode
Možne metode za določanje krvne skupine z aglutinacijo:
- standardna metoda;
- navzkrižna reakcija;
- uporaba tsoliklonov;
- ekspresna metoda z uporabo kompleta "Erythrotest-Groupcard".
Standardna metoda
Aglutinacija krvi se kaže z uporabo bolnikovih rdečih krvnih celic. Uporabljajo se tudi standardni serumi, ki vsebujejo znane antigene.
Eno kapljico štirih serumov damo na ravno ploščo. Nato se vanjo s steklenimi palicami vnese pacientova kri, ki jo je treba pregledati. V tem primeru je priročno uporabljati kapalke. Razmerje naj bo 1:10. Serum in kri se nežno pomešata. Oceno je mogoče opraviti v petih minutah.
Dešifriranje rezultatov testa s preprosto metodo
Po določenem časuv kapljicah seruma opazimo razsvetljenje. Pri nekaterih lahko vidite, da je prišlo do aglutinacije eritrocitov (majhni kosmiči), pri drugih ni.
Obstajajo naslednje možnosti:
- ni reakcije v vseh vzorcih seruma − 1 skupina;
- strjevanje se je pojavilo povsod, razen pri 2. vzorcu - skupina 2;
- brez reakcije samo v 3. vzorcu - 3. skupini;
- aglutinacija se je pojavila povsod – skupina 4.
Tako je glavna stvar pravilno porazdelitev seruma. Potem ne bo težko razvozlati rezultata. Če je aglutinacija krvi šibka, je priporočljivo ponoviti test. V primeru majhnih kosmičev jih pregledamo pod mikroskopom.
Navzkrižna reakcija
Včasih je nemogoče na preprost način natančno določiti krvno skupino. Aglutinacija se v tem primeru izvaja z metodo navzkrižne reakcije. Za razliko od prve različice testa so tukaj pomembni standardni eritrociti. Pacientovo kri zberemo v epruveto, centrifugiramo, nato pa serum izčrpamo s pipeto za nadaljnje raziskave.
Damo ga na krožnik v količini 2 kapljici, nato ji dodamo standardne rdeče krvne celice skupin A in B. Vsebino premešamo s stresanjem posode.
Rezultati metode navzkrižne reakcije
Po petih minutah so vzorci pripravljeni za pregled. Možnosti so:
- lepljenje je prišlo v obeh kapljicah – 1 skupina;
- kosmiči nisoopaženo v nobenem od vzorcev – skupina 4;
- proces je viden v enem vzorcu - 2 ali 3 skupinah (odvisno od tega, kje se je kri strdila).
Coliclon metoda
Za določitev krvne skupine se aglutinacija na ta način izvaja z uporabo sintetičnih serumskih nadomestkov. Imenujejo se tsolikloni. Vsebujejo umetne nadomestke za ά in β-aglutine, znane kot eritrotesti (roza in modra). Reakcija poteka med njimi in pacientovimi rdečimi krvnimi celicami.
Ta metoda je najbolj natančna in zanesljiva. V bistvu ne zahteva ponovnega pregleda. Ocenjevanje rezultatov se izvede na enak način kot pri standardni metodi. Posebnost je, da je treba četrto krvno skupino nujno potrditi z reakcijo s specifičnim sintetičnim nadomestkom (anti-AB). Poleg tega se pri dodajanju raztopine natrijevega klorida ne lepi.
Express-metoda z naborom "kartic skupine eritrotestov"
Glede na možne metode analize pri določanju krvne skupine je treba omeniti, da ima ta metoda svoje značilnosti. Ležijo v tem, da je rezultat mogoče oceniti ne le v laboratoriju, ampak tudi na terenu. Za študijo se uporablja poseben komplet. Vključuje kartico vdolbinice s posušenimi reagenti, ki so že prisotni na dnu. Poleg anti-AB, anti-A in anti-B se za določanje Rh faktorja uporablja anti-D.
Ta metoda ne zahteva posebne priprave, dovoljena je uporaba krvi, odvzete iz prsta, dovoljena je prisotnost konzervansov v njej. Najprej morate v vsako vdolbino dodati kapljico vode, da se sestavine raztopijo. Po tem dodamo kri, rahlo premešamo. V treh minutah bo rezultat prejet.
Lažna aglutinacija
Včasih podatki, pridobljeni po testu, niso resnični. Ta pojav je odvisen od določenih dejavnikov.
Obstajajo tri vrste napačne reakcije:
- Psevdoaglutinacija. Do prave vezi ne pride, eritrociti se preprosto zložijo v obliki kovanca. Če dodate nekaj kapljic fiziološke raztopine, se razpadejo. Podoben pojav prepoznamo pod mikroskopom.
- Hladna aglutinacija krvi. Takšno reakcijo opazimo, če so bili pogoji za študijo neugodni. Ko je temperatura pod +16˚C, lahko pride do lepljenja.
- Panaaglutinacija. Če je v krvi okužba, so rezultati testov lahko napačni. Ta pojav je možen tudi v primeru onkoloških bolezni, s sepso.
Aglutinacija je v medicini zelo pomembna. Omogoča ne samo določitev krvne skupine, temveč tudi identifikacijo povzročitelja bolezni, pa tudi prisotnost okužb. Glavna stvar je pri pripravi na ta postopek upoštevati priporočila zdravnika. Kar zadeva zdravstveno osebje, je njihova naloga ustvariti ugodne pogoje inskladnost z vsemi pravili. To je edini način za doseganje točnih rezultatov pri izvajanju aglutinacije krvi.
