Hepatitis C je okužba jeter, ki jo povzroča virus Flaviviridae HCV, ki je sestavljen iz ene ali več molekul RNA. Praviloma se izvede vrsta diagnostičnih ukrepov za ugotavljanje hepatitisa C pri bolniku. PCR je analiza, ki natančno potrdi diagnozo. Pogosto zaključek dajo zdravniki, ko ima bolnik že prve znake bolezni.
Kaj je hepatitis C
Poškodba jeter zaradi virusne okužbe, ki se prenaša s krvjo ali spolnim stikom, se v medicini imenuje hepatitis C. Povzročitelj je virus neceličnih povzročiteljev okužbe iz družine Flaviviridae, ki vsebuje RNA. Okužba lahko ostane v telesu dolgo časa, ne da bi se pokazala. Zato se hepatitis C (kot diagnoza) šteje za upravičenega le, če se s krvno preiskavo z uporabo PCR RNA RNA odkrije mikroorganizem.
Flavivirus se ne proizvaja v umetno vzgojenih izoliranih celicah. V procesu razmnoževanja povzročitelj okužbe ustvari imunološko različne modifikacije. Ti dejavniki preprečujejo telesu dajanjeustrezen zaščitni odziv, strokovnjaki pa imajo težave pri razvoju učinkovitega cepiva.
Virus se prenaša parenteralno. Za okužbo mora vstopiti v zadostnih količinah neposredno v krvni obtok.
Kateri testi se opravijo za hepatitis C
Virusne patologije jeter se diagnosticirajo z laboratorijskimi preiskavami. Klinične študije hepatitisa C se izvajajo s preučevanjem tujih in nevarnih antigenov ali beljakovinskih spojin (protiteles) v pacientovem biomaterialu, predvsem v krvi.
- Encimski imunski test (ELISA). Metoda temelji na odkrivanju protiteles lgM v krvi. Imunoglobulin velja za največjega in je pentamer. Kaže se v primarnem zaščitnem odzivu limfocitov na neznano tujo snov.
- Radioimunski test (RIA) - kvantitativno določanje lgM imunoglobulina z uporabo označenega radioaktivnega izotopa joda.
- PCR hepatitisa C - določanje virusne RNA v biomaterialu (kri). Ta analiza zanesljivo potrjuje diagnozo.
Testiranje IgG ni zanesljivo. Njegova prisotnost v krvnem serumu lahko kaže ne le na prisotnost flavivirusa, ampak tudi na drugo preteklo okužbo, ki ima enak patogen.
Kaj določa analizo PCR
Polimerazna verižna reakcija (PCR) temelji na identifikaciji regij DNK, specifičnih za določene patogene, v vzorcih materiala za raziskave (epitelij, kri). Analiza omogoča identifikacijo najmanjših patogenih organizmov (virusov) z odkrivanjem njihove RNA ali DNK v biološkem materialu.
Laboratorijski postopek za odkrivanje protiteles proti hepatitisu C PCR se izvaja v 3 fazah:
- Izberi. Proučevani biomaterial se očisti iz nečistoč in DNK se pridobi v mobilni fazi kromatografske kolone.
- Ojačitev. Analiza se izvaja v ciklu naprava-termostat. Z določeno cikličnostjo segreva in ohlaja epruvete. Za eno študijo se izvede do 35 ciklov. Rezultat je zadostno število fragmentov DNK za odkrivanje, identifikacijo in oceno patogena.
- Elektroforeza. Nastale fragmente damo v gel z različno nasičenostjo agaroze in izvedemo elektroforezo. Nastali elektroferogram se analizira na računalniku.
Ne uporablja se samo standardna študija PCR, ampak tudi analiza PCR v realnem času. To je diagnostika v realnem času. Metoda omogoča kvalitativno in kvantitativno analizo, ki omogoča prepoznavanje nastanka in dinamike bolezni ter predpisovanje terapije za odpravo vzroka nastanka patologije. PCR v realnem času se uporablja tudi za določanje čiste kulture povzročiteljev okužb (genotipizacija).
Kako poteka test verižne reakcije s polimerazo
Za diagnozo se lahko uporabi katera koli človeška biološka tekočina. Biomaterial za testiranje na hepatitis C je običajno kri.
Vzorčenje za diagnostiko se izvaja v proceduripisarna. Za odvzem krvi uporabite epruvete za enkratno uporabo s snovjo, ki zavira strjevanje krvi. Dejavnosti, usmerjene v preprečevanje širjenja povzročiteljev okužb, pomagajo preprečiti vstop drugega seva mikroorganizmov od zunaj.
Kri za PCR hepatitisa C se vzame zjutraj na prazen želodec. Vzorec se takoj pošlje v laboratorij. Dovoljeno je shranjevanje biomateriala pri temperaturi od +4 do +8 stopinj Celzija. Posode so označene in opremljene z navodili. Rezultati testov so na voljo v 48 urah, včasih tudi prej.
Vrste PCR
Obseg uporabe polimerazne verižne reakcije je precej širok. Infekcionisti s PCR določajo hepatitis B, bolezni, ki jih prenašajo krvosesne žuželke, AIDS, tuberkulozo. V onkologiji se s to metodo tumorske celice odkrijejo v zgodnji fazi.
Obstaja približno štirinajst vrst analiz. Uporaba ene ali druge vrste je odvisna od obsega in končnih rezultatov analiz. Nekatere vrste PCR so nepogrešljive, če je rezultat potreben v 20 minutah.
Za diagnosticiranje hepatitisa C se uporabljajo 3 vrste polimerazne verižne reakcije:
- Kvalitativna ocena je lahko pozitivna, kar kaže na prisotnost okužbe v telesu, ali negativna, kar kaže na odsotnost flavivirusa.
- PCR v realnem času (kvantitativna analiza) - določi kvantitativno RNA patogena v ie/ml.
- Genotipizacija je analiza, ki razkrije vrsto (genotip) virusa.
Za natančno prepoznavanje in določitev bolezni, sledivse tri vrste študij se uporabljajo za predpisovanje optimalne terapije.
Kvalitativna analiza verižne reakcije s polimerazo
Analiza je obvezna za vse, ki imajo ELISA test, ki je odkril protitelesa proti HCV. Kvalitativni PCR za hepatitis C je standardni test občutljivosti. Metoda je namenjena samo odkrivanju, ne izvaja se štetja ali izolacije drugih snovi.
Za odkrivanje protiteles se uporabljajo posebni testni sistemi s pragom občutljivosti najmanj 50 ie/ml. Če se odkrijejo protitelesa, so predpisani drugi testi za razjasnitev. Če je rezultat negativen, nadaljnje testiranje ne bo opravljeno.
V nekaterih primerih je lažno negativen rezultat lahko posledica nesposobnega laboratorijskega osebja ali slabe kakovosti reagentov. Za zavarovanje je bolje, da analizo opravite drugje.
Kvantitativni PCR
Metoda se uporablja za neposredno preučevanje števila flavivirusov v enem reakcijskem ciklu. Za natančno merjenje se uporabljajo fragmenti DNK, ki se uporabljajo za hibridizacijo, ali fluorescenčno označeni primerji. Obstaja ekonomična možnost zaznavanja z uporabo zelene barve SYBL. Barvilo se zagozdi v majhen utor v DNK in postane modro, ko ga obsevamo z laserjem.
Koncentracijo določi aparat-ojačevalnik v digitalnem ekvivalentu. Vrednosti se lahko med laboratoriji nekoliko razlikujejo in jih je zato treba primerjati z referenčnimi vrednostmi.
Kvantitativni PCRhepatitis C pomaga izbrati optimalni odmerek zdravil in določiti trajanje terapije. Pogostost študije je odvisna od stopnje bolezni, vrste genotipa in predpisanega poteka zdravljenja.
določanje genotipa
Virus hepatitisa C ima spremenljivo genetsko sestavo. Številne modifikacije onemogočajo izdelavo cepiva, poleg tega pa otežujejo zdravljenje. Skupno je bilo identificiranih in zabeleženih 11 genotipov in 100 podtipov. V državah nekdanje ZSSR pri osebah, okuženih s hepatitisom C, PCR odkriva predvsem genotipa 1b in 3.
V prisotnosti katerega koli genotipa se lahko zabava ciroza ali rak jeter. Zato je tako pomembno, da virus odkrijemo pravočasno.
Za nekatere bolnike so nekatera zdravila za boj proti HCV strupena. Genotipizacija vam omogoča, da določite vrsto beljakovin in predpišete učinkovito zdravilo.
V rezultatih tipkalnih testov je številka z malo latinično črko, ki označuje genotip virusa. Če je HCV odkrit, vendar ni vtipkan, to pomeni, da ima oseba genotip, ki ni značilen za določeno geografsko območje.
rezultati analize
Zdravnik se ukvarja z dešifriranjem rezultatov. Samo podatki iz več študij (skupaj z anamnezo in pregledom) lahko dajo splošno resnično sliko zdravstvene anamneze.
- Pri zdravem človeku test za kvalitativno reakcijo v biomaterialu ne zazna ničesar. Če je navedena vrednost "detected", je okužba potrjena in bolnikpotrebuje nadaljnjo diagnozo, ki ji sledi zdravljenje.
- Določanje števila povzročiteljev okužb omogoča oceno virusne obremenitve telesa. Običajno kvantitativni PCR hepatitisa C ne odkrije patogena. Kazalnik do 810^5 velja za nizko obremenitev in ob ustrezni terapiji zagotavlja ugoden izid. Višje vrednosti zahtevajo poglobljen pregled in določitev dolgotrajne terapije, za pozitiven izid katere ne more jamčiti nihče.
- Pozitivni rezultati genotipizacije kažejo, kateri genotip je prepoznan. Negativen rezultat kaže bodisi na odsotnost flavivirusa bodisi na prisotnost genotipa, ki ni značilen za to regijo.
Kaj kaže pozitiven PCR test
Vsaka resna bolezen zahteva celovito diagnozo. Pozitiven PCR hepatitisa C potrjuje diagnozo, vendar je mogoče napovedati le po dodatnih laboratorijskih in instrumentalnih študijah.
Odkrivanje virusa ne daje popolne slike patologije. Treba je ugotoviti njegovo vrsto in naravo, ugotoviti, kako vpliva na jetra in druge organe. Zgodnje odkrivanje HCV ima pogosto ugoden terapevtski izid.
Negativna PCR s pozitivnim ELISA
Ob opazovanju simptomov, značilnih za okvaro jeter, obstaja velika verjetnost, da je okužba že vstopila v telo. Zato se morate obrniti na hepatologa ali specialista za nalezljive bolezni. Med razgovori bo specialist zbral anamnezo in predpisal potreben pregled.
Čerezultati študij o hepatitisu C PCR so negativni, encimski imunski test pa pozitiven, kar kaže na prisotnost protiteles proti flavivirusu v krvi. To se običajno zgodi, ko okužba vstopi v telo v majhni količini, zato se je imunski sistem z njo spopadel sam. Toda takšni ljudje še vedno veljajo za okužene in jih je treba pregledati vsakih 6 mesecev. Če je s takšnimi rezultati testov osebi zavrnjen brezplačen zdravniški pregled, je bolje, da za vzdrževanje zdravja plačate PCR, in če so rezultati pozitivni, se obrnite na specialista za diagnozo in zdravljenje.
Prednosti in slabosti metode
Pri postavitvi diagnoze hepatitisa C ima PCR več prednosti:
- Zgodnje odkrivanje patogena.
- Natančna definicija virusa.
- Učinkovitost diagnostike.
- Najmanjša stopnja napak.
- visoka občutljivost.
Slabosti metode:
- Visoki stroški analize. Test zahteva drago opremo, reagente in visoko usposobljeno medicinsko osebje. Vse skupaj predstavlja precejšnjo količino.
- Stroge zahteve za prevoz biomateriala.
Zdravljenje vnetja jeter
PCR analiza za virus hepatitisa C se šteje za temeljno za diagnozo, ni pa dokončna. Da bi bila terapija učinkovita, so potrebne številne dodatne laboratorijske in instrumentalne študije. Po preteku vsehdiagnostični ukrepi, ki jih zdravnik predpiše zdravljenje:
- Dieta 5 je predpisana.
- Alkohol je popolnoma izključen.
- Skupni sprejem interferona in ribavirina 25 dni.
- Tečaji hepaprotektorjev "Essentiale", "Karsil", "Phosphogliv".
- V posebnih primerih se uporablja diskretna plazmafereza.
Zdravila, ki jih predpiše hepatolog, se uporabljajo redno, brez spreminjanja odmerka. Trajanje jemanja zdravil določi zdravnik po opravljenih kontrolnih testih. Po končanem tečaju terapije morate vsakih šest mesecev obiskati zdravnika.
PCR-diagnostika omogoča identifikacijo povzročitelja hepatitisa C v zgodnji fazi. To prispeva k učinkovitosti terapije in preprečevanju prehoda bolezni v tako nevarne oblike, kot sta ciroza in hepatocelularni karcinom.
