V članku razmislite, kaj je - PCR diagnostika? Humani papiloma virus (HPV) je danes zelo pogosta bolezen, ki se pojavlja v kronični obliki in je polna pogostih recidivov. Polimerazna verižna reakcija (PCR) je najsodobnejša metoda za diagnosticiranje papiloma virusa. Ta metoda velja za zelo zanesljivo in pomaga ugotoviti ne le prisotnost tega virusa v človeškem telesu, temveč tudi njegovo količino in raznolikost. PCR analiza za HPV je občutljiva tudi na neaktivne oblike virusa, pri katerih ni zunanjih manifestacij v obliki genitalnih bradavic in papilomov.
Na čem temelji metoda?
Na podlagi študije pacientove DNK za odkrivanje prisotnosti tujih komponent v tej verigi. Sestavljen je iz štirih nukleotidov, ki so razporejeni v določenem zaporedju. Če virus vstopi v telo, pride do spremembe v vrstnem redu v tej verigi, kar vam omogoča skrbno spremljanje aktivnosti tudi najbolj nepomembnih tujih delcev. Raziskovalna tehnika HPV PCR se izvaja z uporabo virusnih delcev, ki določajo hitrost celične delitve.
Kaj opredeljuje raziskave?
Ta diagnostični princip vam omogoča sledenje aktivnosti HPV ne le, ko je v pasivnem stanju, ampak tudi med inkubacijsko dobo. PCR diagnostika določa:
- prisotnost HPV v telesu;
- sevi, ki okužijo bolnika;
- količinska vsebina v telesu.
Papilomavirus je okužil večino ljudi, vendar močna imunska obramba zatre njegove manifestacije in ne omogoča razmnoževanja. Tako odkrivanja HPV na kvalitativni način ni vedno mogoče opravičiti, saj ni racionalno, če so v telesu prisotni virusni delci, vendar je njihov vpliv tako minimalen, da človeku nikakor ne škodi. Kvalitativna analiza kaže pozitiven rezultat, kar človeka pogosto zmede.
Kvantitativna metoda
Zato se za diagnosticiranje najpogosteje uporablja kvantitativna metoda, ki omogoča sledenje števila virusnih povzročiteljev v telesu in ugotavljanje, kako nevarna je njihova aktivnost. Poleg tega je pomembno ugotoviti raznolikost sevov HPV. Delimo jih glede na stopnjo onkogenosti: nekateri lahko postanejo glavni dejavnik za nastanek onkoloških bolezni, drugi pa so popolnoma varni in lahko povzročijo le nekaj kozmetičnih težav.
Vsaka posamezna situacija zahteva individualen pristop,zato je pred tem laboratorijskim testom priporočljivo, da se posvetujete s kvalificiranim specialistom, ki vam bo povedal, kako in za katere seve bi bilo najbolje testirati, upoštevajoč bolnikovo stanje in klinične simptome.
Indikacije za prevodnost
Najpomembnejši razlog za PCR test za HPV je prisotnost bradavic na telesu.
Okužba s tem virusom je možna samo od osebe. Po prodiranju v krvni obtok se patogeni mikroorganizem začne razmnoževati v zgornjih plasteh kože, kar vodi do razvoja značilnih manifestacij - tvorbe kondilomov ali papilomov. Ker je ta bolezen precej pogosta in se pojavlja pri skoraj 80 % populacije, je verjetnost, da se z njo okuži, izjemno velika. Papiloma virusi se prenašajo preko:
- nezaščiten spolni odnos;
- med poljubljanjem;
- pri rojstvu otroka od mame;
- v gospodinjstvu;
- s tesnim stikom s kožo.
Glavne indikacije za krvni test in PCR bris za HPV so kožni simptomi te bolezni, ki izgledajo kot viseče bradavice na nitastem tankem peclju. Tudi če takih kondilomov na koži ne opazimo, je virus lahko še vedno prisoten v krvi, vendar bo njegov potek asimptomatski. Če je bolniku diagnosticirana okužba s papiloma virusom 18. in 16. podtipa, je priporočljivo, da se redno pregleduje pri specialistih kot sta ginekolog in urolog, opravi diagnostične postopke in se testira na HPV, kerLe s pravočasno diagnozo je mogoče preprečiti razvoj nekaterih vrst raka.
Vrste tehnik
V okviru PCR diagnostike za HPV so bile razvite štiri glavne metode testiranja, od katerih ima vsaka nekaj posebnosti in je predpisana ob upoštevanju stanja bolne osebe. Za izbiro najboljše metode je potreben nasvet strokovnjaka. Torej, štiri metode:
- Kvalitativna metoda, ki se uporablja za zavrnitev ali potrditev prisotnosti virusa v telesu. Njegova glavna pomanjkljivost je nezmožnost določitve vrste seva HPV (samo 14-21 vrst). Najpogosteje se kvalitativna metoda uporablja hkrati z drugimi metodami za odkrivanje papiloma virusa. Rezultat se poroča z dvema ocenama: "ni najdeno" ali "zaznano". To pomeni, da ta tehnika bodisi navaja prisotnost tuje DNK ali označuje njeno odsotnost.
- Genotipizacija je metoda, s katero lahko ugotovimo prisotnost virusa v človeškem telesu in ugotovimo njegovo raznolikost. Ta metoda se uporablja v primerih, ko je treba ugotoviti, ali DNK virusa ostane po zdravljenju ali pa se zaradi nove okužbe opazi ponovitev. Genotipizacija pomaga oceniti učinkovitost terapije z določitvijo vrste HPV. Če je to isti sev, zaradi katerega je bil bolnik zdravljen, potem je bilo zdravljenje neuspešno. Če analiza pokaže prisotnost druge vrste HPV, lahko kažeponovna okužba.
- Kombinirana metoda, ki je visoko specializirana diagnostična metoda, ki temelji na kombinaciji kvalitativnega odkrivanja 16 sevov z uporabo genotipizacije. Rezultat je mogoče predstaviti s 3 odgovori: »odkrit sev 16«, »ni zaznan« in »odkrit HPV vključno s tipom 16«. Ta metoda se uporablja, če sumite na prisotnost vrste papiloma virusa, ki lahko povzroči raka materničnega vratu pri ženskah.
- Kvantitativna metoda PCR za HPV z visokim onkogenim tveganjem, ki omogoča določanje ravni virusa v krvi in spremljanje njegovega razvoja. Šteje se za najbolj informativnega, saj vam omogoča določitev resnosti patološkega procesa, na podlagi katerega je izbrano pravilno zdravljenje. Tehnika temelji na določanju števila virusnih celic znotraj preučenih 100 tisoč. Če je njihova skupna vrednost nad 5, to kaže na visoko koncentracijo papiloma virusa v telesu, kar poveča verjetnost rakavih celic. Če je količina manjša od 3, se koncentracija šteje za zanemarljivo.
Kako se pripraviti in opraviti test?
Kri se lahko vzame kot biomaterial za HPV, vendar se najpogosteje vzamejo izločki iz sečnice pri moških in materničnega vratu pri ženskah.
Posebna priprava za PCR za HPV ni potrebna. Glavni pogoj je, da nekaj ur pred posegom ne urinirate. Poleg tega je priporočljivo, da ne imate spolnih odnosov 2-3 dni pred študijo in nejemljejo alkoholne pijače. Hkrati ne pozabite na intimne higienske postopke.
Za moške
Moški vzamejo bris - glavico penisa in sečnico zdravimo s fiziološko raztopino. Specialist uporablja posebno krtačo, ki se vstavi v sečnico za približno 4 cm. Biološki material zberemo z rahlim vrtenjem, damo v epruveto in pošljemo v laboratorij na raziskavo. Hkrati ga lahko shranite največ 2 dni od trenutka prevzema.
ženske
Razmaz za PCR analizo na HPV pri ženskah se izvaja na naslednji način: na maternični vrat nanesemo sterilno raztopino, nato s čopičem odvzamemo bris iz kanala materničnega vratu. Aparat se vstavi v globino približno 1 cm, nato pa zdravnik z rotacijskimi gibi postrga stene kanala. Biološki material damo v posebno epruveto, kjer ostane približno 15 sekund. V njej ga specialist obriše ob stene in nato vzame ven. Nato se vsebina epruvete pošlje v laboratorijsko testiranje.
Ustrezno vzorčenje materiala za raziskave je ključ do uspešne diagnoze in pridobitve zanesljivega rezultata. Če je hkrati kršena sterilnost in tuji mikroorganizmi prodrejo v epruveto, se lahko med analizo prepozna virus, ki ga v pacientovem telesu pravzaprav ni. Do napake lahko pride tudi zaradi majhne količine materiala, odvzetega za raziskavo.
Kje opraviti PCR za HPV, veliko ljudi zanima. Teste je mogoče opraviti v kateri koli zdravstveniklinika ali laboratorij, na primer v "Invitro" ali "Hemotest".
Prednosti metode
PCR je ena glavnih diagnostičnih metod in trenutno ostaja najbolj priljubljena med zdravniki. Ta študija se izvaja ne samo za odkrivanje HPV, ampak vam omogoča tudi odkrivanje drugih patoloških mikroorganizmov, ki se lahko prenašajo s spolnim stikom. Takšna analiza pomaga pri diagnosticiranju skritih okužb, hepatitisa itd. PCR test za HPV ima številne prednosti pred drugimi metodami za odkrivanje bolezni. Te ugodnosti so:
- Visoka specifičnost. Analiza pomaga pri preučevanju zbranega biomateriala z veliko verjetnostjo ločiti sledi tuje DNK.
- Visoka zmogljivost. Študija PCR je avtomatiziran postopek, ki pomaga izvesti študijo neposredno na dan analize. Ta hitrost omogoča osebi, da dolgo časa ne skrbi za rezultate in jo dobi v svoje roke v nekaj dneh.
- Visoka občutljivost. Testiranje omogoča raziskovanje aktivnosti virusov tudi v inkubacijski dobi, ko so njihove koncentracije zelo nizke. To pomaga preprečiti nastanek patološkega procesa in začeti pravočasno zdravljenje.
- Možnost izvajanja več analiz hkrati. Na podlagi enega odvzetega vzorca krvi se lahko izvede diagnostika za določitev več bolezni hkrati. Na primer, lahko hkratiza identifikacijo povzročitelja gonoreje in klamidije. Hkrati ta postopek ne bo mogel negativno vplivati na zanesljivost rezultata.
Pomanjkljivosti študije
Kljub veliki priljubljenosti in informativnosti te analize, obstaja nekaj negativnih vidikov PCR diagnostike za HPV. Glavna med njimi je verjetnost lažno pozitivnih rezultatov. To se zgodi, ko je terapija že opravljena, okužba je uničena, vendar odmrle virusne celice še vedno ostanejo v tkivih telesa. Obnova celic traja nekaj časa. Če opravite študijo prej kot 2-3 mesece po zdravljenju, lahko PCR pokaže pozitiven rezultat. Tehnika ne opazi nobenih razlik, saj je usmerjena v iskanje virusne DNK, ki jo najdemo tudi v že mrtvih celicah. To prispeva k lažno pozitivnim rezultatom. Tej situaciji se je mogoče izogniti, če se laboratorijski test opravi v časovnem okviru, ki ga določi lečeči zdravnik.
Prepis
Kaj bo pokazala PCR dešifriranje za HPV?
Zdravnik naj interpretira rezultate testa. Pomembno pa je tudi, da se bolnik zaveda strukture lista z rezultati. Če analiza pokaže "DNK ni zaznan", potem v krvi ni papiloma virusa. Če je indikator Lg 5 ali več, to kaže na njegovo visoko koncentracijo v krvi, Lg 3-5 - znatna količina, manj kot 3 - nepomembna količina.
Lažno negativna analiza
Prav tako,lahko pride do lažno negativne analize. Pojavi se, če:
- zbrani biološki material je bil nepravilno shranjen ali prepeljan;
- kršeni so bili sterilni pogoji in v prejeto kri pacienta so prišli drugi mikroorganizmi;
- zaradi neprimernosti reagentov.
Za odpravo možnosti lažno negativnih rezultatov je treba za to analizo izbrati pooblaščen laboratorij z visoko kvalificiranim osebjem.
Podrobno smo preučili, kako in zakaj se izvaja PCR diagnostika. Kaj je, je zdaj jasno.
