Kaj so bakteriološke raziskave? Po kakšni shemi se izvaja? Kaj v tem primeru pomeni varnost? Kakšni so cilji in stopnje bakterioloških raziskav?
Splošne informacije
Bakteriološka preiskava je znanstveni postopek, v katerem se identificirajo bakterije in preučijo njihove lastnosti, da se postavi mikrobiološka diagnoza. Pri tem je zelo pomembna določitev vrste ali vrste nastalega mikroorganizma (mišljena je čista kultura). To spremlja preučevanje biokemičnih in fizioloških lastnosti organizmov ter nagnjenosti k tvorbi toksinov. Za te namene se uporabljajo reakcije precipitacije in aglutinacije. Prav tako se izvaja za okužbo laboratorijskih živali z naknadnim odkrivanjem patoloških sprememb.
Delo s testnim materialom
Algoritem bakteriološke študije zagotavlja strogo upoštevanje posebnih navodil. Tako je treba preskusni material zbrati v sterilnih posodah v aseptičnih pogojih. Prav tako je treba poskrbetizagotoviti čimprejšnjo dostavo v laboratorij. Hladno shranjevanje vzorcev je zaželeno. Tehnika bakteriološkega raziskovanja predvideva številne možne situacije. Tako je zaradi vrste predmeta, lastnosti mikroorganizma in narave bolezni pogosto treba razviti individualna navodila za delo. Pri delu se uporablja veliko različnih metod. Ena najpogostejših je bakterioskopija. Če pa bakterije niso fiksirane, se uporabi zdrobljena ali viseča kapljica. Treba je opozoriti, da je za zadnji dve možnosti značilna povečana stopnja nalezljivosti.
Bakterioskopija
V tem primeru se uporabljajo poteze. Če jih želite ustvariti, morate kapljico tekočine, ki jo preučujete, porazdeliti po površini stekelca. Zates naj ga posuši. To se pogosto zgodi s premikanjem zdravila skozi plamen, pridobljen iz plinskega gorilnika. Čeprav se lahko kot alternativa uporabijo pritrdilne spojine. Da bi označili, da so bila s tem pripravkom opravljena pripravljalna dejanja, je obarvana. Namen takšne manipulacije je natančnost, ki je zelo pomembna pri mikroskopskem in bakteriološkem pregledu. Konec koncev, če zdravilo ponovno uporabite za drug namen, dobite kašo, s katero bo zelo težko učinkovito delati.
Zakaj je bakterioskopija tako priljubljena
Nenazadnje zaradi razpoložljivosti te metode. Če se izvede bakteriološka študija svežega pripravka, potem za določitev patogenalahko uporabimo mikrokemične reakcije ali selektivno obarvanje različnih strukturnih delov mikroorganizma. Kateri je boljši? Natančnejši rezultat je mogoče dobiti pri delu z obarvanim pripravkom. V tem primeru se preskusni material nanese na vnaprej pripravljeno steklo. Pazite na tanek (in po možnosti celo) plast. Po tem morate počakati, da se zdravilo posuši na zraku. Mikroorganizme nato fiksiramo z eno od običajnih metod. Po tem se ohlajeni pripravek obarva z diferencialno ali preprosto barvo. Za to se lahko uporabljajo suhi in naravni pripravki. Po tem ostane še usmeriti ultravijolične ali kratke modre žarke na mesto kopičenja organizmov, kar povzroči, da zažari celoten mikrob ali določeni deli njegovega telesa.
Praktična uporaba bakterioskopije
Uporablja se za diagnosticiranje številnih nalezljivih bolezni. Najbolj znani med njimi so tuberkuloza, gonoreja in ponavljajoča se vročina. Poleg tega se zatečejo k raziskavam, da bi preučili celoten kompleks mikroflore organa ali izdelka. Toda kritiki pogosto opozarjajo na relativno nezanesljivost in netočnost te metode.
Pridelki in subkulture bakterijskih kultur
Izvedite jih s Pasteurjevo pipeto. Izvajanje bakteriološke in citološke preiskave je pogosto težko izvesti brez inokulacije in subkulture med potekom dela. Pri delu s Pasteurjevo pipeto je njena konicaodlomite s pinceto. Samo orodje se nato prenese skozi plamen gorilnika in nato pusti, da se ohladi. Mimogrede, za setev lahko uporabite tako tekoča kot trdna hranila. Na izbiro vpliva, kateri cilji bakterioloških raziskav se zasledujejo. Hkrati se je treba držati algoritma dela in varnostnih ukrepov. Torej, pri delu s tekočim hranilnim medijem je treba zagotoviti, da se ne razlije in ne zmoči robov plute in epruvet. Ko se študija izvaja s trdnim materialom, se za vstop v kulturo pogosto uporablja posebna igla. Ko se setev in ponovno setev izvajata, ju je treba izvajati v bližini plamena plinskega gorilnika. Zaradi čistosti poskusa epruveta ne sme ostati odprta dlje časa. Kar zadeva orodje s kulturo: pazite, da se ne dotika ničesar. Prav tako tehnika bakteriološke raziskave predvideva sežiganje robov epruvete, preden jo zaprete. Končni izdelek je treba podpisati takoj po izdelavi, da se izognete zmedi v prihodnosti.
Učinkovitost setve
Meni je, da ta metoda omogoča pridobivanje natančnejših in zanesljivejših podatkov med bakteriološko diagnozo kot prej obravnavana bakterioskopija. V tem primeru je algoritem dejanj naslednji:
- Na začetku se čista kultura razmaže po površini hranilnega medija, ki se vlije v petrijevko.
- Začetno setev je treba opraviti v razmerah, ki so za vrsto ugodnemikroorganizmi.
- Po dnevu ali dveh se v prisotnosti optimalnega okolja vse primerne kolonije preselijo tja, kjer se lahko maksimalno razvijejo. To jih osvobodi tuje mikroflore.
Končni rezultat je kultura homogenih bakterij, ki jih je mogoče identificirati.
Čiste kulture
Toda kako so narejeni? Za to se uporabljajo biološke in mehanske metode. V prvem primeru imajo veliko vlogo hranilni mediji, kjer so potrebni pogoji, ugodni za razvoj določene kulture. Pristop se lahko uporabi tudi, ko se laboratorijske živali, dovzetne za določeno vrsto bakterij, okužijo. Mehanske metode temeljijo na uporabi sterilnega instrumenta, s katerim kulturo damo v hranilni medij, ki se nahaja v prvi, drugi in tretji petrijevki. Potem je treba počakati, da posamezne kolonije zrastejo in iz njih bo že izstopala čista kultura. Bakterije lahko gojimo tudi v posebnih termostatih, kjer se temperatura vzdržuje na določeni ravni (običajno okoli 37 stopinj). V tem primeru se postopek nadaljuje približno en dan. Toda glede na vrsto mikroorganizmov se lahko določijo drugi izrazi. Pomembna je tudi prisotnost zahtevane koncentracije kisika. Če želite to narediti, uporabite različne metode prezračevanja. Doslej smo govorili o stanju kot celoti in na splošno, zdaj pa se osredotočimo na to, kakšna je shema bakterioloških raziskav.
vaja
Za odkrivanje patogenih mikroorganizmov v telesu pacienta ali potencialnega nosilca se pogosto uporablja niz metod. Uporabljeni materiali in metode so odvisni od ciljev analize, pa tudi od pogojev okolja, v katerem se delo izvaja. V praksi se bakterije najpogosteje odkrijejo s hemokulturami, odvzetimi od osebe ali živali. Če so lokalne lezije dobro opredeljene, lahko iščemo patogene na problematičnih območjih. To je značilno za bolezni, kot so griža, gonoreja, davica in številne podobne. V posebej hudih primerih je ta proces razdeljen na ločene stopnje bakteriološkega pregleda (kar je značilno za tifus). Vsak od njih uporablja svoje metode, katerih cilj je odkriti vzrok okužbe. Oglejmo si podrobneje situacijo s tifusom. V prvem tednu bolezni je najbolj zanesljiv način za diagnosticiranje bolezni hemokulture. Na drugem se za takšno šteje serološka študija. V tretjem tednu se pregleda blato. Zadnja metoda se šteje za preverjanje rekonvalescentov.
identifikacija mikroorganizmov
Začne se s postopkom barvanja. Nato pogledajo, kako lahko bakterija razgradi ogljikove hidrate, aminokisline itd. Poleg tega lahko ta proces dopolnimo s preučevanjem drugih lastnosti, ki jih ima vsak posamezen rod ali vrsta mikroorganizmov. Kot primer je treba navesti možnosti raztapljanja eritrocitov različnih živali, učinek na koagulacijo krvne plazme in raztapljanje strdka.fibrin in tako naprej. Vse to so diferencialne značilnosti posameznih predstavnikov mikrosveta. Za končno prepoznavanje se lahko uporabi tudi serološka identifikacija (vendar to običajno zadeva patogene bakterije, ki spadajo v črevesno družino).
Sklep
Upoštevati je treba, da številnih mikroorganizmov ni mogoče identificirati z metodami, opisanimi v članku. V tem primeru se pogosto uporablja praksa okužbe laboratorijskih živali. Izračun je narejen na podlagi dejstva, da se bo pojavila značilna toksičnost ali patogenost, ki je v umetnih pogojih ne opazimo. Okužba se lahko uporablja tudi kot metoda za kopičenje patogenih mikrobov. In že ko primerjamo značilnosti proučevane kulture, ki jih najdemo v procesu preučevanja bioloških, morfoloških, seroloških in biokemičnih lastnosti, lahko rečemo, da se ve, s kakšnimi mikrobi imamo opravka. Identifikacija pomeni navedbo rodu, vrste in vrste bakterije. Če preučevani mikroorganizem v določenih lastnostih odstopa od svoje tipične značilnosti, je treba to navesti. Številni strokovnjaki menijo, da bo v takih primerih koristna ponovna identifikacija s podvajanjem vseh uporabljenih metod in tehnik. Včasih se lahko raziskave dvignejo na naslednjo raven, ki zahteva resnejši (in dražji) pristop. Če so bili dobljeni negativni rezultati, potem to pomeni, da je pripravekmikroorganizmov ni bilo ali pa niso bili sposobni preživetja. Toda za točnost raziskave, če obstaja sum na številne nosilce bacilov (dizenterija, davica, tifus), so v takih primerih prikazani ponovni pregledi. To je potrebno, da imajo strokovnjaki natančno predstavo o tem, s čim se morajo ukvarjati.
